國(guó)家Ⅰ類創(chuàng)新藥誕生記
——華北制藥重組人源抗狂犬病毒單抗注射液研發(fā)紀(jì)實(shí)
“華北制藥重組人源抗狂犬病毒單抗注射液完成III期臨床試驗(yàn)并取得III期臨床試驗(yàn)報(bào)告，試驗(yàn)結(jié)論為：該藥達(dá)到了設(shè)定目標(biāo)，是安全、有效的。”這個(gè)消息讓華北制藥中央研究院的員工們倍感振奮，這個(gè)結(jié)論意味著，華北制藥科研團(tuán)隊(duì)歷時(shí)16年、投入1.5億元的艱辛努力已經(jīng)結(jié)出碩果。
探索大規(guī)模制備抗體的新路徑
“狂犬病是目前世界上病死率最高的傳染病，一旦出現(xiàn)臨床癥狀，病死率幾乎100%。不過(guò)被狗或者其他可能攜帶狂犬病毒的動(dòng)物咬傷、抓傷之后，立刻給予徹底的傷口部位清洗，再盡早于傷口周邊浸潤(rùn)注射抗狂犬病毒抗體，同時(shí)規(guī)范接種人用狂犬病疫苗，能夠盡早產(chǎn)生對(duì)狂犬病毒的免疫力，防止狂犬病發(fā)生。”華北制藥中央研究院院長(zhǎng)、抗體藥物研制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任高健說(shuō)。
高健介紹，全球有100多個(gè)國(guó)家和地區(qū)有狂犬病流行，年死亡例數(shù)約59000例，是致死人數(shù)最多的動(dòng)物源性傳染病，亞洲的狂犬病病例數(shù)居全球首位，我國(guó)狂犬病死亡人數(shù)連續(xù)多年居法定傳染病死亡人數(shù)第3位。
“現(xiàn)在臨床所用的抗體主要有兩種，一種是馬血清制品，另一種是人血漿制品。”華北制藥中央研究院首席研究員、重組人源抗狂犬病毒單抗注射液研發(fā)項(xiàng)目負(fù)責(zé)人魏敬雙說(shuō)，“馬血清制品價(jià)格便宜，但有可能引起過(guò)敏反應(yīng)、副作用大，現(xiàn)在已經(jīng)很少應(yīng)用了。而人的血漿制品，是通過(guò)給獻(xiàn)漿員反復(fù)接種狂犬病毒疫苗，然后抽取他們的血漿，把很多人所獻(xiàn)的血漿集中到一起，形成一定的量，然后提取其中的免疫球蛋白加工出來(lái)的。”
這樣生產(chǎn)出來(lái)的抗狂犬病抗體，因?yàn)閬?lái)源受限，不但價(jià)格昂貴，不同批次的藥品原材料來(lái)源不一致，還難以避免可能存在的病毒污染風(fēng)險(xiǎn)。
“我們的做法是，把來(lái)源于人體的抗狂犬病毒抗體基因序列，導(dǎo)入到一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞中，培養(yǎng)這個(gè)細(xì)胞使其大量繁殖（單克隆細(xì)胞），將這樣的工程細(xì)胞作為種子，大規(guī)模培養(yǎng)后分離提取這些細(xì)胞產(chǎn)生的抗體制成藥品。抗體來(lái)源于一個(gè)單細(xì)胞，所以質(zhì)量非常穩(wěn)定，避免了病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)，而且整個(gè)過(guò)程是工廠化進(jìn)行，可以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模制備。”魏敬雙說(shuō)。
從零開(kāi)始摸索創(chuàng)新
2004年初，重組人源抗狂犬病毒單抗課題立項(xiàng)，由魏敬雙挑頭，帶領(lǐng)10名隊(duì)員，一切從零開(kāi)始，他們?nèi)硇牡赝度氲郊?xì)胞培養(yǎng)、分離純化、生物檢測(cè)三個(gè)領(lǐng)域的創(chuàng)新和挑戰(zhàn)中……
沒(méi)有現(xiàn)成的經(jīng)驗(yàn)可以借鑒，一切都靠自己摸索和創(chuàng)新。“創(chuàng)新藥研制，國(guó)外有‘兩個(gè)15’的說(shuō)法，意思是需要15年時(shí)間，投入15億美元，并且還要冒著失敗的風(fēng)險(xiǎn)。”高健說(shuō)。
“課題立項(xiàng)初期，課題組擁有的僅僅是抗體的基因序列，重組人源抗狂犬病毒單抗又是一個(gè)全新的東西，必須搞清楚它在何種狀態(tài)下能穩(wěn)定存在并保持療效，如果能把制劑處方做出來(lái)，就算解決了一個(gè)大的瓶頸問(wèn)題。”魏敬雙說(shuō)。
魏敬雙翻閱了大量有關(guān)抗體藥品在制劑中保持穩(wěn)定的文獻(xiàn)資料，花費(fèi)了近半年的時(shí)間，設(shè)計(jì)出15種由各種緩沖液組成的“制劑處方”，再?gòu)募兌取⒒钚缘确€(wěn)定性指標(biāo)對(duì)這15種處方進(jìn)行篩選，各種試驗(yàn)的數(shù)據(jù)都被組員們認(rèn)真地記錄下來(lái)，甚至是一個(gè)微乎其微的數(shù)據(jù)出入，大家都會(huì)聚到一起，分析討論，看看是哪個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)生了偏差，做出分析報(bào)告，并保留成原始資料。整整3個(gè)月后，才最終選定了一個(gè)穩(wěn)定性較高的處方，確定了課題的成藥基礎(chǔ)。在隨后的長(zhǎng)期穩(wěn)定性考察試驗(yàn)中，該制劑處方穩(wěn)定性能保持3年，也就是人們常說(shuō)的藥品有效期能達(dá)到3年。
為了盡早拿到用于后續(xù)各項(xiàng)試驗(yàn)的狂犬抗體樣品，在早期的抗體制備工藝中，接種環(huán)節(jié)需要接觸狂犬病毒，課題組所有成員都打了狂犬疫苗，以防意外。“當(dāng)?shù)谝还弈軡M足下一步實(shí)驗(yàn)的抗體出來(lái)后，大家無(wú)比興奮，更加堅(jiān)定了繼續(xù)走下去的信心。”魏敬雙回憶道。
16年研發(fā)終獲成功
2006年，委托相關(guān)單位開(kāi)展臨床前的動(dòng)物試驗(yàn)；2007年申報(bào)臨床試驗(yàn)；2008年藥審中心組織召開(kāi)審評(píng)會(huì)，各種詳實(shí)可循的試驗(yàn)數(shù)據(jù)得到專家組的認(rèn)可。當(dāng)年11月，課題組接到了補(bǔ)充資料的通知，2009年的春節(jié)，課題組的成員是在查文獻(xiàn)、撰寫補(bǔ)充申報(bào)材料中度過(guò)的；2009年6月，課題組順利拿到臨床試驗(yàn)批件，這是華北制藥有史以來(lái)真正意義上的一類新藥臨床批件。
“臨床試驗(yàn)采用的雙盲、隨機(jī)、對(duì)照試驗(yàn)方法，無(wú)論是接受試驗(yàn)的人和醫(yī)護(hù)人員，都不知道哪一份是新藥、哪一份是對(duì)照藥，從而最大程度地排除心理因素等各種偏差，以獲得最準(zhǔn)確的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。”負(fù)責(zé)臨床試驗(yàn)的李玉鳳說(shuō)，“在設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案時(shí)，不但要考慮療效風(fēng)險(xiǎn)和倫理問(wèn)題，還要有縝密的科學(xué)邏輯，符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。”
I期臨床試驗(yàn)的結(jié)果顯示：志愿者單獨(dú)給予試驗(yàn)藥品或者與狂犬病疫苗聯(lián)用耐受性良好，試驗(yàn)藥品顯示出了良好的安全性。
II期臨床試驗(yàn)結(jié)論：重組人源抗狂犬病毒單抗注射液與疫苗聯(lián)用起效更快，中和作用更高，整體保護(hù)效力優(yōu)于狂犬病人免疫球蛋白與疫苗聯(lián)用；受試者總體耐受性好，無(wú)因不良反應(yīng)而退出試驗(yàn)的受試者。
III期臨床試驗(yàn)結(jié)論為：該藥達(dá)到了設(shè)定目標(biāo)，是安全、有效的。
“這個(gè)品種是全人源設(shè)計(jì)，安全性好，具有抗體質(zhì)量均一、穩(wěn)定性好、工藝簡(jiǎn)便、可連續(xù)規(guī)模化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。從根源上解決了血源免疫球蛋白產(chǎn)品可能存在的病毒污染風(fēng)險(xiǎn)、來(lái)源受限、供應(yīng)量嚴(yán)重不足及價(jià)格昂貴等問(wèn)題。”高健說(shuō)。
“也許有的人一輩子做研發(fā)，到退休也看不到成果，而我卻很幸運(yùn)和自豪，每一次收獲都印證了我們離成功的目標(biāo)越來(lái)越近，就覺(jué)得自己的付出沒(méi)有白費(fèi)，這十幾年的研發(fā)路，有各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)的支持和鼓勵(lì)，有我的隊(duì)友陪伴和幫助，我很快樂(lè)！”魏敬雙說(shuō)。
（華藥集團(tuán) 鄭建衛(wèi)）